Chromatography เป็นเทคนิคการแยกที่มีประสิทธิภาพที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในสาขาต่าง ๆ รวมถึงเคมีชีวเคมีเวชภัณฑ์และวิทยาศาสตร์สิ่งแวดล้อม ในประเภทที่แตกต่างกันของเหลว - ของเหลวโครมาโตกราฟี (LLC) และของเหลว - โครมาโตกราฟีของเหลว (LSC) เป็นสองวิธีพื้นฐานและที่แตกต่างกัน ในฐานะผู้จัดหาโครมาโตกราฟีการทำความเข้าใจความแตกต่างเหล่านี้เป็นสิ่งสำคัญสำหรับการจัดหาผลิตภัณฑ์และโซลูชั่นที่เหมาะสมให้กับลูกค้าของเรา ในบล็อกนี้เราจะสำรวจความแตกต่างที่สำคัญระหว่างของเหลว - ของเหลวและของเหลว - โครมาโตกราฟีของเหลว
หลักการ
ของเหลว - โครมาโตกราฟีของเหลว
ในของเหลว - โครมาโตกราฟีของเหลวการแยกจะขึ้นอยู่กับการกระจายตัวของการวิเคราะห์ระหว่างสองเฟสของเหลวที่ไม่สามารถเข้าใจได้: เฟสคงที่และเฟสเคลื่อนที่ เฟสคงที่เป็นของเหลวที่ตรึงอยู่บนการรองรับที่มั่นคงในขณะที่เฟสเคลื่อนที่เป็นของเหลวอื่นที่ไหลผ่านคอลัมน์ พาร์ทิชันวิเคราะห์ระหว่างสองเฟสของเหลวตามความสามารถในการละลายและความสัมพันธ์ของพวกเขาสำหรับแต่ละเฟส สารประกอบที่มีความสัมพันธ์ที่สูงขึ้นสำหรับเฟสคงที่จะใช้เวลามากขึ้นในนั้นและชะลอตัวในภายหลังจากคอลัมน์ในขณะที่ผู้ที่มีความสัมพันธ์ที่สูงขึ้นสำหรับเฟสมือถือจะชะลอตัวลงก่อนหน้านี้
ตัวอย่างเช่นในการย้อนกลับ - เฟสของเหลว - โครมาโตกราฟีของเหลวซึ่งเป็นหนึ่งในรูปแบบที่พบมากที่สุดเฟสคงที่ไม่ใช่ขั้ว (เช่นไฮโดรคาร์บอน - ซิลิกาเคลือบซิลิกาเคลือบ) และเฟสเคลื่อนที่เป็นขั้ว วิเคราะห์ที่มีลักษณะที่ไม่เป็นขั้วมากขึ้นจะมีปฏิสัมพันธ์อย่างมากกับเฟสที่ไม่อยู่กับขั้วและมีเวลาเก็บรักษานานขึ้น
ของเหลว - โครมาโตกราฟีของแข็ง
ในทางกลับกันของเหลว - โครมาโตกราฟีที่เป็นของแข็งอาศัยการดูดซับและการดูดซับของ analytes บนพื้นผิวของเฟสคงที่ของแข็ง เฟสที่อยู่กับที่ของแข็งมีไซต์ที่ใช้งานอยู่ซึ่งสามารถโต้ตอบกับ analytes ผ่านกองกำลังต่าง ๆ เช่นกองกำลังแวนเดอร์ไวลส์, ไดโพล - ปฏิสัมพันธ์ไดโพลและพันธะไฮโดรเจน เมื่อเฟสเคลื่อนที่ซึ่งเป็นของเหลวจะไหลผ่านคอลัมน์วิเคราะห์จะถูกดูดซับเข้าสู่เฟสที่อยู่กับที่และจากนั้นจึงถูกดูดซับขณะที่เฟสเคลื่อนที่พยายามที่จะพกพาไปตาม การแยกจะขึ้นอยู่กับความแตกต่างของความแข็งแรงในการดูดซับของ analytes ในเฟสคงที่
ซิลิกาเจลเป็นเฟสคงที่ที่ใช้กันทั่วไปในของเหลว - โครมาโตกราฟีของเหลว มันมีพื้นที่ผิวขนาดใหญ่และกลุ่ม silanol บนพื้นผิวที่สามารถโต้ตอบกับการวิเคราะห์ขั้วโลก การวิเคราะห์ที่มีการดูดซับที่แข็งแกร่งในซิลิกาเจลจะมีเวลาเก็บรักษานานขึ้นในขณะที่ผู้ที่มีการดูดซับที่อ่อนแอกว่าจะชะลอมากขึ้น
ระยะนิ่ง
ของเหลว - โครมาโตกราฟีของเหลว
เฟสคงที่ในของเหลว - โครมาโตกราฟีของเหลวเป็นของเหลวที่รองรับในเมทริกซ์ที่เป็นของแข็ง วัสดุสนับสนุนนี้ควรเป็นที่เฉื่อยและมีพื้นที่ผิวขนาดใหญ่เพื่อให้พื้นที่สัมผัสขนาดใหญ่ระหว่างเฟสที่อยู่กับที่และมือถือ วัสดุสนับสนุนทั่วไป ได้แก่ ซิลิกาเจลอลูมินาและโพลีเมอร์ที่มีรูพรุน
ทางเลือกของของเหลวที่อยู่กับที่ขึ้นอยู่กับประเภทของ LLC และลักษณะของ analytes ที่จะแยกออกจากกัน ในปกติ - เฟส LLC เฟสที่อยู่กับที่เป็นขั้วเช่นน้ำหรือตัวทำละลายอินทรีย์ขั้วโลกตรึงอยู่บนการสนับสนุนที่เป็นของแข็ง ในการย้อนกลับ - เฟส LLC ดังที่ได้กล่าวไว้ก่อนหน้านี้เฟสคงที่ไม่ใช่ขั้วโลกโดยทั่วไปจะเป็นไฮโดรคาร์บอนยาวโซ่ที่ยึดติดกับพื้นผิวของซิลิกาเจล
ของเหลว - โครมาโตกราฟีของแข็ง
เฟสคงที่ในของเหลว - โครมาโตกราฟีของแข็งเป็นวัสดุที่เป็นของแข็ง ซิลิกาเจลเป็นเฟสคงที่ที่ใช้กันอย่างแพร่หลายมากที่สุดเนื่องจากพื้นที่ผิวสูงความเสถียรทางเคมีและความสามารถในการปรับเปลี่ยนคุณสมบัติพื้นผิว ขั้นตอนที่อยู่กับที่ของแข็งอื่น ๆ ได้แก่ อลูมินาซึ่งมักใช้สำหรับแยกสารประกอบพื้นฐานและถ่านซึ่งเหมาะสำหรับการแยกสารประกอบขั้วโลกและกึ่งขั้ว
คุณสมบัติพื้นผิวของเฟสคงที่ของแข็งสามารถปรับเปลี่ยนเพื่อปรับปรุงประสิทธิภาพการแยก ตัวอย่างเช่นโดยการรักษาซิลิกาเจลด้วยสาร silanizing กลุ่ม silanol บนพื้นผิวของมันสามารถถูกปิดกั้นลดปฏิสัมพันธ์กับการวิเคราะห์ขั้วโลกและเปลี่ยนการเลือกของการแยก
ขั้นตอนมือถือ
ของเหลว - โครมาโตกราฟีของเหลว
เฟสเคลื่อนที่ในของเหลว - โครมาโตกราฟีของเหลวเป็นของเหลวที่เลือกตามความเข้ากันได้กับเฟสคงที่และการวิเคราะห์ ในปกติ - เฟส LLC เฟสมือถือไม่ใช่ขั้วโลกเช่นเฮกเซนหรือส่วนผสมของเฮกเซนและตัวทำละลายขั้วโลกจำนวนเล็กน้อยเช่นเอทิลอะซิเตต ในการย้อนกลับ - เฟส LLC เฟสเคลื่อนที่เป็นขั้วโลกมักจะเป็นส่วนผสมของน้ำและตัวทำละลายอินทรีย์
องค์ประกอบของเฟสมือถือสามารถปรับได้เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพการแยก โดยการเปลี่ยนอัตราส่วนของตัวทำละลายในเฟสมือถือขั้วของเฟสมือถือสามารถเปลี่ยนแปลงได้ซึ่งส่งผลกระทบต่อค่าสัมประสิทธิ์พาร์ติชันของ analytes ระหว่างเฟสที่อยู่กับที่และมือถือ ตัวอย่างเช่นการเพิ่มสัดส่วนของตัวทำละลายอินทรีย์ในเฟสมือถือในการย้อนกลับ - เฟส LLC จะลดเวลาการเก็บรักษาของ analytes
ของเหลว - โครมาโตกราฟีของแข็ง
เฟสเคลื่อนที่ในของเหลว - โครมาโตกราฟีที่เป็นของแข็งก็เป็นของเหลวเช่นกัน ฟังก์ชั่นหลักของมันคือการพกพาวิเคราะห์ผ่านคอลัมน์และเพื่อแข่งขันกับ analytes สำหรับไซต์การดูดซับในระยะที่อยู่นิ่ง ทางเลือกของเฟสมือถือขึ้นอยู่กับลักษณะของเฟสคงที่และ analytes
สำหรับซิลิกาเจลเป็นเฟสที่อยู่กับที่ตัวทำละลายขั้วโลกเช่นน้ำเมทานอลและอะซิโตนิทริลสามารถใช้เป็นเฟสเคลื่อนที่ได้ ตัวทำละลายที่ไม่ใช่ขั้วเช่นเฮกเซนถูกนำมาใช้เมื่อแยกการวิเคราะห์ที่ไม่ใช่ขั้วโลก เฟสเคลื่อนที่ยังสามารถมีสารเติมแต่งเช่นกรดฐานหรือเกลือเพื่อปรับค่า pH และความแข็งแรงของไอออนิกซึ่งอาจส่งผลกระทบต่อการดูดซับและการดูดซับของ analytes ในเฟสคงที่
การเลือกแยก
ของเหลว - โครมาโตกราฟีของเหลว
การเลือกสรรการแยกในของเหลว - โครมาโตกราฟีของเหลวส่วนใหญ่จะถูกกำหนดโดยความแตกต่างในค่าสัมประสิทธิ์พาร์ติชันของการวิเคราะห์ระหว่างเฟสที่อยู่กับที่และมือถือ สารประกอบที่มีขั้วที่แตกต่างกันขนาดโมเลกุลและกลุ่มการทำงานจะมีพฤติกรรมพาร์ติชันที่แตกต่างกัน
การย้อนกลับ - เฟสของเหลว - โครมาโตกราฟีของเหลวมีประโยชน์อย่างยิ่งสำหรับการแยกสารประกอบขั้วโลกและขั้วโลกที่ไม่ได้อยู่ในระดับปานกลาง มันสามารถแยกสารประกอบตามการชอบน้ำ ตัวอย่างเช่นสามารถใช้ในการแยกยาเสพติดประเภทต่าง ๆ ผลิตภัณฑ์ธรรมชาติและมลพิษต่อสิ่งแวดล้อม
ของเหลว - โครมาโตกราฟีของแข็ง
การเลือกสรรการแยกในของเหลว - โครมาโตกราฟีของเหลวขึ้นอยู่กับความแตกต่างในความแข็งแรงในการดูดซับของ analytes ในระยะนิ่ง โดยทั่วไปแล้วสารประกอบขั้วโลกจะมีการดูดซับที่แข็งแกร่งขึ้นในเฟสที่อยู่กับที่ขั้วโลกเช่นซิลิกาเจลในขณะที่สารประกอบที่ไม่ใช่ขั้วจะมีการดูดซับที่อ่อนแอกว่า
ของเหลว - โครมาโตกราฟีที่เป็นของแข็งเหมาะสำหรับการแยกสารประกอบที่มีขั้วและกลุ่มการทำงานที่แตกต่างกัน มันสามารถใช้ในการแยกไอโซเมอร์เพราะไอโซเมอร์มักจะมีพฤติกรรมการดูดซับที่แตกต่างกันในเฟสคงที่เนื่องจากความแตกต่างในโครงสร้างโมเลกุลของพวกเขา
แอปพลิเคชัน
ของเหลว - โครมาโตกราฟีของเหลว
โครมาโตกราฟีของเหลว - ของเหลวโดยเฉพาะอย่างยิ่งโครมาโตกราฟีของเหลวที่กลับด้าน - มีการใช้งานที่หลากหลาย ในอุตสาหกรรมยามันถูกใช้สำหรับการวิเคราะห์ยารวมถึงการกำหนดความบริสุทธิ์ของยาการวิเคราะห์สารเมตาบอไลต์ยาและการควบคุมคุณภาพของสูตรยา นอกจากนี้ยังใช้ในอุตสาหกรรมอาหารเพื่อการวิเคราะห์สารเติมแต่งอาหารวิตามินและยาฆ่าแมลง ในด้านวิทยาศาสตร์สิ่งแวดล้อมสามารถใช้ในการวิเคราะห์มลพิษในน้ำดินและอากาศ
ตัวอย่างเช่นในการวิเคราะห์ตัวอย่างยาการย้อนกลับ - เฟสของเหลว - โครมาโตกราฟีของเหลวสามารถแยกสารออกฤทธิ์ออกจากสิ่งสกปรกและผลิตภัณฑ์การย่อยสลาย ด้วยการใช้เฟสมือถือที่เหมาะสมและวิธีการตรวจจับความเข้มข้นของแต่ละองค์ประกอบสามารถกำหนดได้อย่างถูกต้อง
ของเหลว - โครมาโตกราฟีของแข็ง
ของเหลว - โครมาโตกราฟีที่เป็นของแข็งมักใช้สำหรับการแยกโมเลกุลขนาดเล็กขั้วโลก มันมักจะใช้ในการแยกกรดอะมิโนเปปไทด์และนิวคลีโอไทด์ ในการวิเคราะห์ผลิตภัณฑ์ธรรมชาติของเหลว - โครมาโตกราฟีของเหลวสามารถใช้ในการแยกและชำระส่วนประกอบที่แตกต่างจากสารสกัดจากพืช
ตัวอย่างเช่นในการแยกอัลคาลอยด์ออกจากพืชของเหลว - โครมาโตกราฟีของเหลวที่มีเฟสอยู่นิ่งของซิลิกาเจลและเฟสเคลื่อนที่ที่เหมาะสมสามารถแยกอัลคาลอยด์ที่แตกต่างกันตามขั้วและคุณสมบัติการดูดซับ
ประสิทธิภาพของคอลัมน์
ของเหลว - โครมาโตกราฟีของเหลว
ประสิทธิภาพของคอลัมน์ในของเหลว - โครมาโตกราฟีของเหลวได้รับผลกระทบจากปัจจัยหลายประการรวมถึงขนาดอนุภาคของการรองรับเฟสคงที่อัตราการไหลของเฟสเคลื่อนที่และความยาวคอลัมน์ โดยทั่วไปขนาดอนุภาคขนาดเล็กส่งผลให้มีประสิทธิภาพของคอลัมน์ที่สูงขึ้นเนื่องจากมีพื้นที่ผิวที่ใหญ่ขึ้นสำหรับการทำงานร่วมกันระหว่างเฟสที่อยู่กับที่และมือถือ อย่างไรก็ตามขนาดอนุภาคที่เล็กลงยังเพิ่มแรงดันแบ็คในคอลัมน์ซึ่งต้องใช้ปั๊มที่ทรงพลังกว่า
อัตราการไหลของเฟสมือถือยังมีผลต่อประสิทธิภาพของคอลัมน์ ในอัตราการไหลที่สูงมาก analytes อาจมีเวลาไม่เพียงพอที่จะปรับสมดุลระหว่างเฟสที่อยู่กับที่และมือถือซึ่งนำไปสู่ยอดเขาที่กว้างขึ้นและประสิทธิภาพที่ลดลง ที่อัตราการไหลที่ต่ำมากเวลาการวิเคราะห์จะยาวและการแพร่กระจายของ analytes ในคอลัมน์อาจทำให้เกิดการขยายตัวสูงสุด
ของเหลว - โครมาโตกราฟีของแข็ง
ในของเหลว - โครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพของคอลัมน์นั้นเกี่ยวข้องกับคุณสมบัติของเฟสคงที่และเฟสมือถือ พื้นที่ผิวและขนาดรูขุมขนของเฟสคงที่ของแข็งมีบทบาทสำคัญ พื้นที่ผิวขนาดใหญ่ให้ไซต์การดูดซับมากขึ้นซึ่งสามารถปรับปรุงประสิทธิภาพการแยก อย่างไรก็ตามหากขนาดรูขุมขนมีขนาดเล็กเกินไปการแพร่กระจายของการวิเคราะห์ลงในรูขุมขนอาจถูก จำกัด ซึ่งนำไปสู่ประสิทธิภาพที่ต่ำกว่า
ทางเลือกของเฟสมือถืออาจส่งผลกระทบต่อประสิทธิภาพของคอลัมน์ เฟสมือถือที่มีขั้วที่เหมาะสมและความหนืดสามารถมั่นใจได้ว่ามีความสมดุลที่ดีระหว่างการดูดซับและการสลายตัวของการวิเคราะห์ในระยะที่อยู่กับที่ทำให้เกิดยอดเขาที่คมชัดและมีประสิทธิภาพสูง
ในฐานะซัพพลายเออร์โครมาโตกราฟี
ในฐานะผู้จัดหาโครมาโตกราฟีเราเข้าใจถึงความสำคัญของการจัดหาผลิตภัณฑ์ที่เหมาะสมสำหรับทั้งของเหลว - ของเหลวและของเหลว - โครมาโตกราฟีที่เป็นของแข็ง เรานำเสนอคอลัมน์ที่หลากหลายขั้นตอนที่อยู่กับที่และตัวทำละลายเฟสมือถือเพื่อตอบสนองความต้องการที่หลากหลายของลูกค้าของเรา
ตัวอย่างเช่นเรามีช่องทางกรองจุลชีววิทยา 250mlซึ่งสามารถใช้ในการเตรียมตัวอย่างสำหรับโครมาโตกราฟี ช่องทางกรองนี้ทำจากวัสดุที่มีคุณภาพสูงและมีขนาดรูพรุนที่แม่นยำเพื่อให้แน่ใจว่ามีการกรองตัวอย่างที่มีประสิทธิภาพ
ของเราตัวกรองเซลล์ 100umเป็นผลิตภัณฑ์ที่มีประโยชน์อีกอย่างหนึ่งสำหรับการเตรียมตัวอย่าง มันสามารถใช้ในการกำจัดอนุภาคขนาดใหญ่และเศษซากจากตัวอย่างทางชีวภาพก่อนการวิเคราะห์โครมาโตกราฟีเพื่อให้มั่นใจถึงความแม่นยำและความสามารถในการทำซ้ำของผลลัพธ์
นอกจากนี้ของเราผู้ถือทดสอบขีด จำกัด ของจุลินทรีย์ได้รับการออกแบบมาสำหรับการทดสอบขีด จำกัด ของจุลินทรีย์ซึ่งเป็นส่วนสำคัญของการควบคุมคุณภาพในการใช้งานโครมาโตกราฟีโดยเฉพาะอย่างยิ่งในอุตสาหกรรมยาและอาหาร
หากคุณมีความสนใจในผลิตภัณฑ์โครมาโตกราฟีของเราหรือต้องการข้อมูลเพิ่มเติมเกี่ยวกับของเหลว - ของเหลวและของเหลว - โครมาโตกราฟีที่เป็นของแข็งโปรดติดต่อเราเพื่อรับการจัดซื้อและการอภิปรายเพิ่มเติม เรามุ่งมั่นที่จะให้บริการโซลูชั่นที่ดีที่สุดและผลิตภัณฑ์ที่มีคุณภาพสูงเพื่อตอบสนองความต้องการของคุณ
การอ้างอิง
- Snyder, LR, Kirkland, JJ, & Glajch, JL (1997) การพัฒนาวิธีการ HPLC ในทางปฏิบัติ John Wiley & Sons
- Poole, CF, & Poole, SK (2003) Chromatography วันนี้ Elsevier
- McMaster, MC (2006) HPLC สำหรับนักวิทยาศาสตร์เภสัชกรรม John Wiley & Sons